Väikesed lapsed

Mis on preimplantatsiooni diagnoos IVF-is ja mida see näitab?

Pin
Send
Share
Send
Send


Selles osas saate teada:

In vitro viljastamise protseduuri ettevalmistamisel (IVF) on igal naisel või abielupaaril teatav hirm, mis on seotud sündimata lapse tervisega. Tõepoolest, keegi ei suuda ennustada, kuidas viljastamine toimub ja kui terve embrüo osutub. Isegi mõned täiesti terved paarid (nende osakaal on 5%) pärast rasestumist, geneetilise haigusega laps või kromosomaalsed kõrvalekalded võivad tekkida loomulikult, mida isegi sünnieelne skriinimine ei pruugi mõnikord ilmneda.

Õnneks on täna tehnikaid, mis võimaldavad teil tuvastada embrüo struktuuri rikkumisi selle arengu esimestel päevadel. Esiteks, see on IVF-i eelimplantaadi geneetiline diagnoos. Vaatleme üksikasjalikumalt, milline on sellise uuringu olemus.

Menetluse nimest on juba selge, et see geneetiline diagnoos viiakse läbi enne embrüo implanteerimist, mis oli välja kujunenud ekstratsermaalselt naise emakasse. Loodusliku kontseptsiooniga PGD-d ei teostata.

PGD ​​analüüs IVF-is on kõrgtehnoloogiline uuring, mis viiakse läbi esimesel embrüo arengu ajal - kolmandal või viiendal päeval. Protseduuri peamine eesmärk on valida absoluutselt terve embrüo edasiseks taasistutamiseks emakasse. See analüüs viiakse läbi väikese koguse bioloogilise materjaliga ja tuleb läbi viia lühikese aja jooksul.

Samuti on oluline märkida, et PGD-l peab olema asjakohane näidustus.:

  • oodatava ema vanus on üle 35 aasta vana
  • Tulevase isa vanus on üle 45 aasta
  • ühe või mõlema tulevase vanema perekonnas edastatakse samu onkoloogilisi või geneetilisi haigusi põlvest põlve,
  • Rh-konfliktist tingitud loote (või vastsündinud lapse) surmava ema esinemine haiguse ajal;
  • alaline raseduse katkemine (raseduse katkemine või embrüo arengu peatamine), t
  • ebaõnnestunud IVF katsed (rohkem kui kolm)
  • madalad isased spermogrammid (spermatogeneesi kahjustus, madal spermatosoidide arv seemnevedelikus, kõrge spermatosoidide arv ebanormaalse struktuuriga).

PGD ​​võimaldab tuvastada embrüos nii kromosoomi kõrvalekaldeid kui ka geneetilisi haigusi. Ei ole välistatud, et pärast PGD (PGD) diagnostikat mitme saadud embrüo IVF ajal tühistatakse taasistutamine nende halva kvaliteedi tõttu (see võib juhtuda erinevatel põhjustel). Mida vanem naine, seda suurem on embrüote tagasilükkamise protsent.

Selline uuring nagu PGD on osaliselt sünnieelse diagnoosimise alternatiiv, kuid see ei saa muidugi seda täielikult asendada. Naised, kes rasestuvad pärast PGD-ga kaasnevat IVF-i, samuti kõik teised, peaksid läbima rutiinse ultraheliuuringu ja muid uuringuid, et jälgida lapse emakasisest arengut.

Tuleb lisada, et tänapäeval on Venemaal vähe keskusi, kus hinnatakse erinevaid embrüo genotüüpe, kasutades PGD-i pre-implantaadi geneetilise diagnoosi meetodit IVF-is - Peterburis on see Genesise paljunduskeskus. Kõrgtehnoloogilised seadmed, embrüoloogiliste arstide, paljunemisspetsialistide, geneetikute kvalifikatsioon ja pikaajaline praktika võimaldavad viljatutel paaridel saada terve lapse õnnelikeks vanemateks.

PGD ​​- mis see on?

Alates hetkest, kui naise muna ühineb mehe sperma rakkudega, on kõik kindlaks määratud geneetilisel tasemel - lapse juuste värv ja kasv, intellektuaalne võime ja sugu, samuti võimalikud geneetilised kõrvalekalded ja haigused, mida laps vanematelt, vanavanematelt või teistelt sugulastelt pärineb .

Implantaadieelne diagnostika on genoomiliste uuringute kompleks, mis võimaldab embrüos tuvastada vaid mõne päeva vanuseid erinevaid arenguhälbeid, haigusi, sündroome ja muid probleeme. PGD ​​suudab tuvastada umbes 150 pärilikku geneetilist tervisehäiret, mille hulgas on üsna tavaline - Down'i sündroom, Turner ja üsna haruldane - tsüstiline fibroos, hemofiilia, liblikasündroomi jms.

Spetsiaalsete tehnikate ja täpsete seadmete abil määratakse haiged embrüod ja skriinitakse välja. Emakaõõnde siirdamiseks kasutavad naised ainult kvaliteetseid, tervislikke ja elujõulisi embrüoid.

Standardne IVF ei sisalda implantatsioonieelse diagnoosi kohustuslikku etappi. Pärast viljastamist ja embrüote kasvatamist mitme päeva jooksul hinnatakse ainult kasvukiirusi, purustamiskiirusi ja embrüote elujõulisust. Pärast seda viiakse nad naise emakaõõnde. Kumb neist juurdub ja juurdub üldse on suur küsimus. Standardse IVF efektiivsus on umbes 35%.

Kui teostatakse implantatsioonieelne diagnostika, ei pruugi tulevased vanemad muretseda lapse tervisliku seisundi pärast, isegi kui neil on teatud geneetilised probleemid. Lisaks on IVF efektiivsus PGD-ga mõnevõrra kõrgem - umbes 40-45%. See on tingitud asjaolust, et suur embrüol, isegi kui see on implanteeritud emakasse, on väga vähe arengu- ja ellujäämisvõimalusi. Terve ja uuritud embrüo saab tõenäolisemalt jala ja hakkab kasvama ja arenema.

Uuringu eesmärk

PGD ​​on väga soovitatav vanematele, kellel on geneetilised haigused, mida laps saab pärida. Samuti ei kahjustaks selline embrüote esialgne geneetiline uurimine, kui tulevaste vanemate lähisugulaste seas on pärilikke haigusi.

Diagnoos enne implanteerimist on oluline ja vajalik paaride jaoks, kus üks vanematest kannab sugu kromosoomiga seotud haigust. Näiteks kannab naine hemofiilia geeni, kuid laps saab haige ainult siis, kui see on meessoost laps. PGD ​​määrab antud juhul ainult mõne päeva vanuste embrüote soo ja arstid valivad ümberistutamiseks ainult embrüod, mida ei ohusta hemofiilia, st tüdrukud.

Negatiivse Rh-teguriga naisel ja mitmel rasedusel varem (ei ole oluline, kuidas nad lõppesid), soovitatakse PGD-d, kui in vitro viljastamiseks kasutati positiivse Rh-teguriga abikaasa sperma. Sel juhul valivad arstid kõigist saadud embrüotest ainult need, kes pärisid ema reesuse identiteeti. Sel juhul jätkub rasedus pärast IVF-i riski vähenemist ja lapsele ei teki hemolüütilise haiguse ohtu.

PGD ​​on soovitatav paarile, kui naisel on varem olnud kaks või enam nurisünnitust, kui on esinenud abordi katkemise juhtumeid ja ka juhul, kui üks abikaasadest esimeses abielus või koos on lapsel, kellel on kromosoomi kõrvalekalded või geneetilised patoloogiad. Diagnostika enne ülekandmist võimaldab välja arvata embrüote arvu, mida kaalutakse siirdamiseks, kes on haiged või kellel ei ole geneetilist päritolu.

Teise või kolmanda IVF protokolli implanteerimisele eelnev diagnostika võimaldab kõrge täpsusega kindlaks teha eelmiste katsete põhjused.

Ja täiesti mittestandardsed, kuid kahjuks on tegelik olukord - vanemad lähevad IVF-ile, et saada laps, kes võib saada näiteks luuüdi doonoriks oma vanema venna või õe jaoks. Sellisel juhul on loomulikule kontseptsioonile tuginemine liiga riskantne. Sündinud laps ei pruugi olla haigestunud sugulase jaoks doonoriks sobiv.

Implantaadieelne diagnostika aitab väljavalitud embrüotest valida üksikuid geneetilise informatsiooni kombinatsioone, mis tagavad laste genoomse kokkusattumise. Seda uuringut nimetatakse HLA tüpiseerimiseks.

Mida näitab uuring?

Implanteerimisele eelnev geneetiline diagnoos võimaldab teil eelnevalt tuvastada mitmesuguseid haigusi ja seisundeid, mille puhul laps võib olla elujõuline või keelatud. Kõik sõltub geneetiku poolt antud soovitustest. Vajadusel uuritakse embrüoid ainult teatud kriteeriumide ja geenimutatsioonide puhul, kuid üldiselt on võimalik hinnata kõiki uuringus määratud parameetreid.

Näiteks määrab PGD 97-99% täpsusega pimeduse ja kurtuse, kaasasündinud kurtuse, retinoblastoomi, Fanconi aneemia, neurofibromatoosi, fenüülketonuuriat, müopaatiat, väänddüstooniat, Duchene lihasdüstroofiat ja mitut kümmet ohtlikku ja ravimatut haigust ja sündroomi.

PGD ​​määrab ka embrüo kariotüübi, selle veregrupi ja Rh-teguri, soo, mutatsioonide esinemise geenitasemel, vanematele ebatavalise ja esmakordselt avaldunud.

Kes on määratud?

Kuna implantatsioonieelne diagnoos ise ei ole odav rõõm. Iga täiendav samm on soovitatav mitte iga naine, kes on julgenud in vitro viljastada. Seda pakutakse kõigile, kuid on olemas patsiendikategooriad, kes on väga ebasoovitavad embrüote esialgse geneetilise hindamise keeldumiseks enne emakasse üleviimist.

Need patsiendid hõlmavad:

  • "Vanus" naised ja paarid. Vanuse tõttu vananevad ja kaotavad meeste ja naiste suguelundid oma tervise. Narkootikumide, halbade harjumuste, ebasoodsa ökoloogia ja just viimaste aastate mõjul võivad nende DNA-komplektid muteeruda. Seetõttu on “vanusega seotud” naistel ja meestel suurem loote kromosoomide kõrvalekallete risk. PGD ​​on väga soovitatav üle 35-aastastele naistele, samuti paaridele, kellele mees on üle 40-aastane.
  • Rh-negatiivsed naisedkellel olid abordid, raseduse katkemised, sünnitus, lapsed sündisid hemolüütilise haigusega. Diagnoos on asjakohane ainult siis, kui abikaasal on positiivne reesus verefaktor. Kui kasutatakse doonori sperma, valitakse meessoost biomaterjal esialgu negatiivse Rh-teguriga, siis on Rh-positiivsete embrüote saamise tõenäosus null.
  • Naised, kellel on juba 1–2 ebaõnnestunud IVF-katse kogemus objektiivsete põhjuste puudumisel (protokollid viidi läbi korrektselt ja ilma tüsistusteta, puudub endometrioos ja muud implantaadi tõkked).
  • Kui sperma viljastamiseks kasutatakse madala sperma kvaliteedi näitajatega väetamist (teratosoospermia, asoospermia, astenosoospermia). Loodusliku kontseptsiooniga surevad madala kvaliteediga sperma rakud, neil ei ole võimalust viljastada, IVF-i abil võivad nad muna viljastada, sest loomulik valik on halvenenud, mis võib viia paljude patoloogiate tekkimiseni lootele.

Diagnostika tüübid

Embrüote geneetiline diagnoos on mitmeid. Need erinevad teadusuuringute, tehniliste nüansside, seadmete ja uurimismeetodite poolest. Peame loendama peamised laborid ja geneetilised andmed:

  • FISH - See on fluorestseeruva hübridisatsiooni meetod. See on üsna tavaline uuring, mille maksumus on madal, võrreldes teiste implantatsioonieelse diagnoosimise meetoditega. Kuid selle täpsus on mõnevõrra madalam kui teistel meetoditel. Seda meetodit kasutatakse laialdaselt Venemaa, Ukraina ja Valgevene kliinikus. Väliskliinikud jätsid selle praktiliselt maha, kuna ilmnesid täpsemad uuringud. Lisaks sellele, et uuring toimub kiiresti - mõne tunni jooksul. Negatiivne külg on see, et paljusid kromosoome ei uurita.
  • CGH - võrdlev genoomne hübridisatsioonimeetod. Väga kallis viis. Ja nii rahaliselt kui ajutiselt. Kuid tuvastatud patoloogiate loend on suurem kui eespool kirjeldatud meetodil ja täpsus on mõõtmatult kõrgem. Muuhulgas võimaldab see diagnoosimismeetod enne taasistutamist määrata, millistel embrüotel on suurem implanteerimise võimalus.
  • PCR - polümeraasi ahelreaktsiooni meetod. See näitab embrüo, tema veregrupi reesuse identiteeti ja üsna suurt geneetiliste probleemide nimekirja. Uuring nõuab bioloogiliste vanemate kohustuslikku eeluuringut geneetiliste mutatsioonide kohta. Kui naine saab viljastamiseks doonorloomi või doonori ootsüüte, ei saa PCR-meetodit kasutada.
  • Ngs - sekveneerimismeetod. See on kaasaegne implantatsioonieelse diagnoosimise meetod, mis ühendab kõige paremini eespool loetletud. See annab siiski kõige täielikuma pildi embrüote tervislikust seisundist ja selle maksumus on kõrgem kui teiste meetodite puhul.

Kuidas toimub uurimine?

Selleks, et embrüoloogidel ja geneetikutel oleks võime PGD-d teha, tuleb eelnevalt saadud hormonaalse stimulatsiooni abil saada piisav arv munasid. Kui see on väiksem kui 3-4, siis tavaliselt ei teostata implantaadi eelset diagnoosi. Pärast seda, kui arstid korraldavad munade kohtumise puhastatud sperma, jälgitakse embrüote arengut 2-5 päeva. Siis saab embrüoloog valida kõige elujõulisema. Viiendal päeval on blastotsüstidel juba umbes 200 rakku. Ilma et see piiraks embrüot, on võimalik igast embrüost geneetiliseks uurimiseks võtta umbes 5-7 rakku.

Rakke kogutakse kaasaegsete kõrgtäpsusega laserite abil, rakkude kestad on biopsia ja kasutatakse teisi meetodeid. DNA ahela uuring annab põhjalikku teavet selle kohta, kas embrüo on terve. Pärast seda on soovitatav ülekanne.

Kui paar nõustub embrüote esialgse geneetilise diagnoosiga, võib embrüo siirdamine ise edasi lükata. Kui standardse IVF protokolli puhul viiakse see läbi 2, 3 või 5 päeva pärast viljastamist, siis võib PGD tulemusi oodata mitu tundi kuni 5-6 päeva. Seega pikendatakse IVF-tsüklit vähemalt nädalaga. Protokolli maksumus võib suureneda juhul, kui embrüote esialgne diagnoos on 40-240 tuhat rubla.

Kõik sõltub sellest, mitu embrüot kavatsete uurida, millist eespool kirjeldatud meetodit testitakse.

Kulude vähendamiseks võib paar kasutada kvoodivahendeid, diagnostika on hõlmatud OMSi poolt pakutavate teenuste loeteluga, kuid iga kliinik peaks seda probleemi eraldi selgitama. Mõned teevad PGD-d eelarve arvelt, teised - mitte.

Võimalikud tüsistused

Nagu juba mainitud, saadakse geneetika uuringu materjal biopsia abil. Vaatamata ultramodernsele täppisvarustusele on selle protseduuri käigus lootele veel vigastuste oht. Kõige sagedamini vigastatud on "kolm päeva". Tuleb märkida, et vigastuse tõenäosus on üsna madal - umbes 3% ja uuringu eelised on palju suuremad. Vastasel juhul võivad selle IVF-i komplikatsioonid olla samad, mis standardprotokollis IVF-ga.

Igasugune in vitro viljastamise etapp võib olla seotud teatud riskidega ja see ei lähe kuhugi. On oluline, et kõik riskid oleksid väikesed.

Paar peab teadma, et isegi kaasaegsed ja täpsed instrumendid, millega kõrgeima kvalifikatsioonikategooria arstid ei taga 100%, et laps on terve. Seega võib ulatuslike mosaiikidega esineda bioloogilisi vigu ja haige embrüot võib naise juurde üle kanda. See tõenäosus on, kuid see on väga väike - mitte üle 0,05%.

Maailma Tervishoiuorganisatsiooni ametliku teabe kohaselt suurendab PGD-ga seotud IVF protokolli edukuse tõenäosust umbes 7-10% võrreldes baasiga 35%. Samas ei ole Venemaa segmentis nii implantatsioonieelse diagnostika kohta nii palju positiivseid kommentaare.

Mõned naised märgivad, et embrüote elulemus, millest rakud võeti analüüsiks, on mõnevõrra halvem ja seetõttu on üsna vähe kommentaare ebaõnnestunud IVF protokollide kohta koos loote esialgse geneetilise diagnoosiga. Ravim ei kinnita seda populaarset arvamust ning statistika ametlik statistika ei näita edukalt siirdamise protsenti pärast embrüote uurimist.

Sageli küsivad naised, kas lapse soo valimiseks on võimalik teha IOP, sest lisaks sellele, et ma tõesti tahan lapsi, tahan ma ikka kas poja või tütre. On olemas tehniline võime soo kindlaksmääramiseks, kuid ükski arst ei eralda „mittevajaliku” soo embrüoid, välja arvatud juhul, kui on olemas konkreetne viide geneetikale. (sugu kromosoomiga seotud haiguste puhul). Embrüote diskrimineerimine soo järgi on Venemaal seadusega keelatud.

Läbivaatuste kohaselt võib diagnoosimisprotsess ise, mis võib kesta mitu päeva, naisele palju kogemusi, sest ta ei tea, kui palju kõrge kvaliteediga embrüotest selgus ja kas nad üldse välja tulid. Помимо того, ей нужно поддерживать состояние эндометрия в нужной форме -принимать назначенные лекарства, сдавать кровь на прогестерон, делать несколько УЗИ, чтобы определить толщину функционального слоя матки. Это важно, чтобы перенос прошел максимально успешно и плодное яйцо смогло имлантироваться.

Случается, что пока идет диагностика, «удачное» для переноса время проходит. Sellisel juhul saab protokolli katkestada ja testi läbinud embrüod külmutatakse ja saadetakse krüopanki. Nende ülekandmine toimub järgmises protokollis.

Ennetava geneetilise diagnoosi keerukuse kohta vt järgmist videot.

arstlik retsensent, psühhosomatika spetsialist, 4 lapse ema

Mis on PGD

Muna või embrüo kromosoomide komplekti uuritakse laboris. Arvestades embrüo varajaset arengut, vähendatakse vigastuste ohtu 1% -ni. Protseduur on ette nähtud paralleelselt protokolliga ettenähtud peamise raviga. Siiski vajab see rohkem folliikulit, nii et munasarjade hormonaalne stimulatsioon viiakse läbi intensiivsemas režiimis.

Kõik vanemate kromosomaalsed mutatsioonid ei ohusta nende lapse tervist. Patoloogia areng sõltub emade ja isa geenide märkidest ja kombinatsioonist.

Muteerumismärke on kahte tüüpi: domineeriv ja retsessiivne. Domineeriva mutantse geeni ülekandmine lapsele suurendab lapse patoloogia riski 50% võrra. Kui vanemad on retsessiivse tunnuse kandjad, ilmub geneetiline haigus, kui ema ja isa mõlemad "haige" geenid lastele edasi antakse.

Lisaks on mõned sugu puudutavad geneetilised patoloogiad. Seega näeb naissoost kakskümmend kolmas kromosoomipaar välja nagu XX ja isane-sarnane XY. Seetõttu ei põhjusta ühe kromosoomi rikkumised haigust, kuna teine ​​blokeerib selle toime. Terve sündinud laps jätkab defektse kromosoomi kandjat.

Meestel ei ole sellist kaitset, mistõttu poisid sünnivad neid geneetilise patoloogiaga ja pooledel juhtudel saavad tüdrukud "defektse" kromosoomi kandjateks.

Kasutades embrüote eelpostatsiooni geneetilist diagnoosi, loob geneetika spetsiifilise kombinatsiooni, mida embrüo pärsib. Saadud teave võimaldab meil kindlaks teha, kas laps on sündinud patoloogiaga või muutub ainult kromosomaalse defekti kandjaks. Uuritakse kõiki saadud embrüoid, millest valitakse kõige puhtam.

Seda analüüsi ei tohi segi ajada implantaadi eelsete geneetiliste skriinimistega. PGD ​​ja PGS erinevus on oluline. PGD ​​viiakse läbi, et tuvastada ravimatuid geneetilisi patoloogiaid ja minimeerida haigestunud lapse riske. PGS on uuring, mis võimaldab määrata kromosoomide arvu, mis on kooskõlas embrüo sünni ja loote arenguga. Lihtsamalt öeldes on ASG ülesanne suurendada raseduse võimalusi tervete embrüote valimisel. Vanematel, kellele on määratud PGS, ei ole pärilikke tüüpi patoloogiaid, kuid nende esinemise oht on olemas.

Niisiis viiakse sellisel eesmärgil läbi in vitro viljastamise kord koos PGD-ga:

  • "Ennetada" embrüoid, millel on defektsed geenid taasistutamiseks,
  • Uuri välja põhjused, miks eelmised IVF-i protokollid on edukalt lõppenud,
  • Vähendada vastuvõtva vanema patoloogiaga lapse riski;
  • Määrake lapse sugu, kõrvaldades sugu järgi kromosomaalsed kõrvalekalded,
  • Tuvastada embrüod, millel on eelsoodumus geneetilise tüübi patoloogiatele;
  • „Leidke” embrüo, mis on optimaalne HLA-süsteemiga koos teiste perega, kes saavad ravi ajal doonoriks, teiste lastega;
  • Vähendada katkestamise tõenäosust varases staadiumis,
  • Vähendada hemolüütilise haiguse võimalust,
  • Valige üks „ideaalne” embrüo, kõrvaldades mitmekordse raseduse võimaluse.

Geneetiline diagnostika võib tuvastada ja kõrvaldada sellised ohtlikud patoloogiad:

  • Tay-Sachsi tõbi,
  • Sirelrakkude aneemia,
  • Gaucher 'tõbi,
  • Verdnig-Hoffmani tõbi,
  • Retinoblastoom,
  • Horey Huntington,
  • Downi sündroom,
  • Neurofibromatoos,
  • Hemofiilia,
  • Müopaatia
  • Achondroplasia,
  • Fenüülketonuuria,
  • Alperi sündroom,
  • Polütsüstiline neeruhaigus
  • Duchenne'i lihasdüstroofia,
  • Retiniit pigmentosa,
  • Gottingtoni tõbi,
  • Dyushen Myodystrophy,
  • Tsüstiline fibroos
  • Aneemia Fanconi,
  • Kurtide vaigistamine
  • Torsioondüstoonia,
  • Pemphigus,
  • Edwards'i sündroom.

See nimekiri ei ole piiratud esitatud patoloogiatega: neid on rohkem kui 150 liiki.

Pange tähele, et valede negatiivsete tulemuste korral salvestatakse. Fakt on see, et mõned uurimismeetodid diagnoosivad ainult teatud arvu kromosoome. "Arvestamata" geenid võivad olla defektsed.

Mõnikord on mutatsioonide kujunemine mosaiik. Uuringu käigus diagnoositakse rakk tervena ja mutatsioon esineb selle arengu ajal.

Millal on PGD vajalik?

Oleme juba öelnud, et PGD-d ei tehta kõigile patsientidele, kes on taotlenud in vitro viljastamist. Menetlusele on teatavad viited:

  • Vanemad on kromosomaalsete defektide kandjad, mistõttu on lapse geneetiliste kõrvalekallete ülekandumise oht väga suur. "Kandja" tagab kromosoomide ümberkorraldamise või monogeensete haiguste olemasolu.
  • Vanemate kategooria vanemad: üle 36-aastased emad, vanemad, kes on üle 40 aasta. Mida vanemad abikaasad on, seda suurem on geenimutatsioonide tekkimise risk, isegi kui tulevastel vanematel on „õige“ kromosoomide komplekt.
  • Pärast varasemaid rasedusi sündisid lapsed, kes surid Rh-konflikti tagajärjel.
  • Munades ja sperma on tuvastatud defektsed geenid ja kromosoomid.
  • Spermogramm on tuvastanud inimesel tõsiseid kõrvalekaldeid (patoloogiad, nagu asoospermia või oligozoospermia),
  • Eelmised katsed rasestuda IVF-iga on olnud viljatud,
  • Arenevad rasedused lõpevad embrüo arengu varases staadiumis nurisünnitustega,

Arvestades geneetiliste haiguste muljetavaldavat loetelu, tehakse IVF-i PGD kõigile naistele, kelle vanus on ületanud kolmekümne viie aasta märgi. Selle põhjuseks on vanusega seotud muutused, mis võivad tuua kaasa ebameeldivaid üllatusi isegi loomuliku raseduse ajal. Sellised tegurid kiirendavad ja süvendavad munade vananemist:

  • Pikaajaline ravi tugevate ravimitega
  • Eluviisid varem seotud alkoholi, nikotiini, narkootikumide tarbimisega,
  • Krooniline patoloogia,
  • Ohtlikud kutsealase tegevuse tingimused, t
  • Halb ökoloogia.

Sellistel juhtudel näidatakse geneetilist diagnoosi:

  • Lapse sündi seostatakse HLA-süsteemiga kokkusobivate õige tüvirakkude saamisega vanema lapse ravimiseks.
  • Kokkusobimatus reesusfaktor
  • Abikaasad on lähedased sugulased,
  • Paar oli kokku puutunud kiirgusega.

PGD-ga IVF suurendab oluliselt protokolli kulusid. Seetõttu otsustab naine iseseisvalt uuringu vajaduse. Tuletame meelde, et in vitro viljastamine lõpeb ainult 20-40% juhtudest rasedusega. Geneetiline diagnoos tuvastab mitte ainult võimalikke geenimutatsioone, vaid suurendab ka edukate kontseptsioonide võimalusi.

PGD ​​ettevalmistamine ja läbiviimine IVF-iga

Embrüote geneetilise diagnoosimise ettevalmistamine implanteerimiseks eelneb abielupaari konsulteerimisele ja asjakohaste näidustustega täielikule uurimisele. Arst ütleb üksikasjalikult protseduuri plusse ja miinuseid. Naisele selgitatakse, et geneetiline diagnoos nõuab suurema arvu küpsete munade arvu. Seetõttu intensiivistub munasarjade hormonaalne stimulatsioon, mis suurendab liigse stimuleerimise riski IVF ajal. Pärast kõiki diagnostilisi meetmeid jätkake PGD protseduuriga.

See koosneb seitsmest etapist:

  1. Munade ekstraheerimine ja nende viljastamine laboris, t
  2. 3-5 päeva kestev loote areng,
  3. Parimate, kõige elujõulisemate embrüote valimine,
  4. Rakkude ekstraheerimine biopsia embrüost,
  5. Kinnitus blastomere,
  6. Hübridisatsioon,
  7. Saadud teabe dekodeerimine.

Veelkord me mäletame, et uuring ei mõjuta embrüo tervist: sündimata lapse elundid ja kuded "ei osale" menetluses.

Pärast dekrüpteerimist eraldab geneetik sobivad ja "defektsed" embrüod. Kui tuvastatakse 2 kromosoomi, mis vastavad standarditele, on sellised embrüod taasistutamiseks. Vähenenud kõrvalekalletega munade teket ei saa implanteerida.

PGD ​​meetodid

Kaasaegne reproduktiivtehnoloogia teostab embrüo PGD nelja meetodiga:

Mõelge iga tehnika spetsiifikale.

Molekulaarne tsütogeneetiline meetod on meetodi teine ​​nimi. Seda kasutatakse laialdaselt postsovetlikus ruumis, see on kõige demokraatlikum. Fluorestsentsi in situ hübridisatsiooni (kala) oluline puudus on diagnoosi ebatäpsus, sest see meetod uurib ainult osa kromosoome.

PGD ​​meetodi puhul kulub kala 5 tundi. Selle aja jooksul määrab geneetik järgmised olulised tegurid:

  • Kromosoomi järjestus
  • Sooline laps,
  • Kõige tavalisemate geneetiliste kõrvalekallete olemasolu.

Seda meetodit nimetatakse võrdlevaks genoomiliseks hübridiseerimiseks. See võtab palju rohkem aega ja maksab rohkem. Sellel tehnikal on siiski mitmeid olulisi eeliseid, mis eristavad seda teistest uuringutüüpidest:

  • "Leiab" kõige elujõulisemad embrüod, kellel on parim implantatsioonipotentsiaal,
  • See testib paljusid tüvirakke, mis vähendab oluliselt vale diagnoosimise riski,
  • Diagnostilised meetmed viiakse läbi külmutatud munadega, mis kantakse üle krüoprotokollile.

PCR on polümeeri ahelreaktsioon. Ta suudab leida mitte ainult kromosoomide toimimise defekte, vaid ka monogeensed patoloogiad. PCR-i abil määratakse vanemate vastuolude ja embrüote reesuse antikehad.

Oluline tingimus enne uuringu läbiviimist on vanemate kohustuslik diagnoos geenmutatsioonide olemasolu kohta. Selline uuring kõrvaldab vead rakkude mutatsioonist tuleneva patoloogia diagnoosimisel.

Doonormuna kasutav IVF ei võimalda uuringut PCR-iga.

Kõrge läbilaskevõimega järjestamine on kõige arenenum diagnostiline meetod PGD. Nüüdseks genereerimine on kõige kallim ja efektiivsem geneetiline diagnoos, mis võimaldab teil uurida kõiki 23 kromosoomipaarit. Kogu genoomne analüüs viiakse läbi, kuna uuringu käigus uuritakse DNA järjestuse õigsust.

Geneetilise diagnoosi maksumus

IVF nõuab tõsiseid kulutusi. Geneetiline diagnoos suurendab mõnikord hinda, kuna protseduuri jaoks vajalikud seadmed ja materjalid on väga kallid.

On võimatu anda ühemõttelist vastust sellele, kui palju PGD kulusid on, sest uuringu hind sõltub mitmest tegurist:

  • Diagnostiline meetod
  • Uuritud embrüote arv,
  • Lisakatsete kasutamine
  • Kromosoomide translokatsiooni uuring.

Diagnoosi maksumus sõltub uuritud anomaaliate arvust.

Moskvas on PGD maksumus embrüo kohta 25 000 kuni 30 000 rubla. Põhjaliku uuringu jaoks peate maksma 100 000 kuni 250 000 rubla.

PGD ​​analüüsi asjakohasus

PGD ​​diagnostika peamiseks eeliseks on see, et kõik meditsiinilised protseduurid viiakse läbi enne rasedust, samas kui lootel on endiselt emakas. Analüüs on oluline paaride puhul, kellel on suurem risk, et embrüotel on tõsised kromosomaalsed kõrvalekalded, mis põhjustavad:

  • nurisünnitus
  • probleeme implantatsiooniga
  • närbumine rasedus
  • intellektuaalse või füüsilise puudega lapse sündi.

Tsitaat: "Embrüote õigeaegne PGD aitab vältida probleemseid olukordi, suurendab korduvalt tõenäosust, et rasedus lõpeb terve lapse sünniga."

Marina V. Shapnevskaya, “Sünnituse” kliiniku embrüoloog

Huvitav on see, et PGD-ga IVF võimaldab planeerida isegi loote sugu.


Rakkude kogumine PGD analüüsi jaoks

PGD ​​näidustused koos IVF-iga

Mitte kõik paarid, kes otsustavad IVF-i läbida, teevad PGD diagnostikat. Seda tüüpi uuringute jaoks on ranged meditsiinilised tähised. Reeglina saavad abikaasad, kellel on suur oht ohtlike geneetiliste häirete ülekandmiseks lastele, preimplantatsiooni analüüsi kandidaadid.

PGD ​​põhieesmärgid IVF-is on:

  • kariotüübi kõrvalekalletega embrüote sõelumine, t
  • minimeerida embrüo ülekandumise riski emakaõõnde, millel on geneetilised kõrvalekalded, t
  • tõsiste geneetiliste häirete suhtes eelsoodumusega embrüote õigeaegne avastamine, t
  • sündimata lapse soo kindlaksmääramine, et vältida suguhaiguste levikut, t
  • põhjuste määramine, miks implanteerimist ei esinenud in vitro viljastamise eelmistes katsetes, t
  • embrüo Rh-teguri identifitseerimine, et välistada hemolüütilise haigusega lapse sündi;
  • HLA tüpiseerimine, kui tulevane laps peaks saama vanema venna või õe doonoriks.

Saadud bioloogilise materjali uurimine

Indikaatorid embrüo diagnoosimiseks enne IVF-i on järgmised:

  • naise vanus on üle 35-aastane ja mees on üle 40-aastane,
  • spermatogeneesi kõrvalekalded,
  • üks abikaasadest on kromosomaalsete või geneetiliste patoloogiate kandja idurakkudes, t
  • mitmed ebaõnnestunud IVF-katsed,
  • harilik abordi naistel (kui ajaloos on kaks või enam nurisünnitust), t
  • loote surm eelmise raseduse ajal Rh-konflikti tõttu.

Embrüote geneetilise diagnoosimise protseduurid

PGD-ga IVF-i hulka võivad kuuluda ainult munad või valmis embrüod. Viimane võimalus on eelistatavam, kuna see on võimalikult informatiivne - munarakus on ainult naise geneetiline materjal ja embrüos mõlemad vanemad.


Materjali proovide võtmine PGD analüüsiks toimub tavaliselt 3. päeval

Analüüsi käigus teostatakse ühe blastomere biopsia nelja kuni kümne olemasoleva embrüoga, mis on lõhustamisetapis. See juhtub tavaliselt kolmandal päeval. Käsitletud manipulatsioonid ei kahjusta tulevast lootust.

Embrüote kontrollimisel (see võtab aega kuni kaks päeva) viiakse need emakaõõnde, nagu tavalisel IVF-protokollil. Oluline on, et taasistutamine toimuks hiljemalt inimkeha arengu viiendal päeval.

Kui kasutatakse külmsäilitamist, on PGD diagnostiline potentsiaal laiem. Niisiis, kui te võtate biopsia ja säilitate embrüod, saate teha kõik vajalikud uuringud kiirustamata ja taastada järgmise tsükli.

PGD ​​embrüote meetodid

On mitmeid tõhusaid meetodeid preimplantatsiooni diagnoosimiseks:

  • FISH. Asjakohane, kui teil on vaja välistada struktuursete või numbriliste kromosomaalsete kõrvalekallete olemasolu - translokatsioonid ja aneuploidia. Biopsia käigus saadud materjal viiakse klaasplaadile, kuumutatakse teatud temperatuurini ja jahutatakse seejärel järk-järgult. Sellisel juhul on koor purunenud, tsütoplasma väljub. DNA segmendid on märgistatud spetsiaalsete värvainete - fluorestseeruvate sondidega. Seejärel saab geneetik fluorestsentsmikroskoobi abil kromosoomide arvu lugeda, kontrollida, kas nende hulgas on ebanormaalseid.
  • Ngs. See on uusim PGD diagnostiline meetod krüotsüklis, mille abil saab põhjalikult uurida 23 kromosomaalset paari. NGSi abil saadud andmete täpsus on 99,9%, st vead on ebatõenäolised. Samuti võimaldab tehnoloogia tuvastada kromosomaalseid ja monogeenseid anomaaliaid, mutatsioone, et eristada translokatsiooni tervest kromosomaalsest komplektist, kõrvaldades seeläbi blastomere biopsia vajaduse.
  • Polümeraasi ahelreaktsioon (PCR). Meetod, mille eesmärk on tuvastada DNA spetsiifilisi koopiaid. Selleks denatureeritakse see kahekordse lõime lahtivõtmiseks. Siis nad võtavad ühe fragmendi, lisavad sellele spetsiifilisi ensüüme ja kahekordistavad geneetilise materjali kogust. See võimaldab uurijal näha defektseid nukleotiiditsoone. PCR meetod on näidatud, kui on vaja välistada monogeensete haiguste ülekandumine lapsele (kui üks nende partneritest või mõlemad on nii ebatervislike geenide kandjad kui ka neil on ohtliku geneetilise patoloogia kliinilised ilmingud).

Tuleb märkida, et PFD meetodid IVF-is ei ole 100% vastastikku asendatavad. Igaüks neist on mõeldud konkreetsete haiguste rühmade tuvastamiseks. Seetõttu saab ainult arst otsustada, milline neist meetoditest on sobivam abielupaarile, kes on teda taotlenud.


PGD ​​- tervisliku lapse sünni garantii

PGD ​​embrüod - teenuste maksumus

IVF-i embrüote PGD on suhteliselt kallis teenus. Moskva kliinikus “Sünniks” on selle hind vahemikus 83 500 kuni 90 500 rubla. See protseduur on väga keeruline ja hõlmab kallite seadmete ja uuenduslike tarbekaupade kasutamist. Selle läbiviimiseks saab ainult kõrgeima taseme eksperte.

Kliinikus “Sünniks”

Geneetilise diagnoosi suhteliselt kõrged kulud enne implanteerimist on seotud manipulatsioonide keerukusega. Kui jälgite spetsialiseeritud kliinikute pakkumisi, saab PGD-d edastada soodsamatel tingimustel.

PGD-analüüside eest makstud raha maksab alati ise - terve lapse sünnimine on kaalul. Raskete geneetiliste kõrvalekalletega lapse ravi ja hooldamine maksab vanematele palju suuremat summat.

Kas IVF on PGD-ga ohtlik?

Преимплантационная генетическая диагностика применяется во всем мире. Ее безопасность научно доказана. Биопсия осуществляется только на том этапе развития эмбриона, когда его клетки еще не дифференцированы. See tähendab, et edasise purustamise korral asendatakse eemaldatud rakk teistega, ilma et see mõjutaks tulevast lootust.

PGD ​​ei suurenda lapse arenguvigade tõenäosust, vaid vastupidi, tagab terve lapse sündi.

Nad tegid pgd Peterburis NGC-s, kogu protokoll oli ka seal. Mu abikaasa ja mina oleme vanad (38 ja 40 aastat vanad), väga mures! Ja headel põhjustel. Arst Gvasalia ütles, et meie puhul on pgd praktiliselt kohustuslik. Kontrolliti nelja embrüot, protseduur näitas tervislikumaid: kaks istutati. Kasvab kaks kuud. )
Menetlus on hämmastav ja väga kasulik! Muidugi olime mures selle pärast, et biopsia oli ohtlik, kuid NGC-s selgitasid nad meile kõike, nad isegi näitasid selle protsessi videot ja seal pole tõesti midagi valesti, ainult eelised! On veel erinevaid meetodeid pgd, valisime NGC. Arstide sõnul on kõige täpsem.
>> PGD ei suurenda lapse arenguvigade tõenäosust, vaid vastupidi, tagab terve lapse sündi.

See on tõsi! Kasutage kaasaegset tehnoloogiat, oleme 21. sajandil))

Üldised mõisted

Implantaadi eelsed geneetilised diagnoosid võimaldavad põhjalikult uurida ja välistada kromosomaalsete kõrvalekallete olemasolu üldiselt või ühe konkreetse kõrvalekalde korral. Hiljuti on paralleelselt varajase defektiga läbi viidud geenide sõelumine, mis võivad põhjustada kasvajate esinemist täiskasvanueas (munasarjad, sooled, rinnad).

Genoomiliste haiguste transportimisel ema poolt viiakse enne viljastamist läbi mitu polaarset munarakku. Kirjeldatud meetodid on alternatiiviks varajase sünnieelne diagnoosimisele, mis võimaldab teil vältida raseduse katkemist, kui äkki on lootel geneetiline patoloogia.

Implanteerimisele eelnev geneetiline diagnoos võimaldab teil tuvastada tulevase lapse sugu juba sõeluuringu käigus. Seda kasutatakse seksiga seotud anomaaliate tekkimise vältimiseks.

Kes on skriinitud?

Implantaadi eelset geneetilist diagnoosi (PGD) tehakse järgmistel juhtudel:

  1. Üks või mõlemad pärilikud haigused või kariotüübi muutused. Sageli teavad partnerid ise oma probleemidest, harvemini - nad saavad sõeluuringu käigus teada.
  2. Tavaline nurisünnitus. Selle probleemiks ei ole vanemate anomaaliad (nad ei pruugi olla üldse), kuid loote geneetilised mutatsioonid, mis põhjustavad nurisünnitust.
  3. IVF programmi läbivate isikute vanus on üle 38 aasta.
  4. Rohkem kui 3 ebaõnnestunud katset in vitro viljastamise ajal.
  5. Meeste viljatus.
  6. ICSI (intratsütoplasmaatiline sperma süstimine) lisamine väetamisprogrammi. Protsess on täis embrüo geneetiliste kõrvalekallete arengut.
  7. Ajalugu libisemise juhtumid.

PGD ​​funktsioonid

Uuringud implantatsioonieelse geneetilise diagnoosi valdkonnas viitavad sellele, et meetodil on õigus eksisteerida, aidata diagnoosida ja ennetada kromosomaalseid kõrvalekaldeid, kuid nõuab siiski edasist parandamist.

Funktsioonid PGD on järgmised:

  • sõelumise katkemise määr on väiksem kui ilma selleta,
  • Praegu puuduvad tõendid raseduse suurenemise võimalikkuse kohta, t
  • on olemas vale tulemuse võimalus: embrüo on terve ja tulemus näitab kõrvalekaldeid, embrüo on haige ja uuring viitab teisiti (5-10% juhtudest).

Implantaadi eelsete geneetiliste diagnooside läbiviimine (blastomere uurimine)

Pärast in vitro viljastamise kokkulepet hindab reproduktoloog abielupaari PGD vajadust. Tõendite olemasolu korral võivad partnerid protseduuri kokku leppida või sellest keelduda. Seejärel allkirjastatakse dokument, mis kinnitab uuringu läbiviimise luba.

Kolmandal päeval pärast embrüo viljastamist võtab geneetik analüüsiks ühe moodustatud blastomere rakkudest. Arvatakse, et sellel ei ole lootele mõju, kuna kõik rakud on omavahel asendatavad.

Spetsialist viib läbi uuringuid ühes eelnevalt valitud valdkonnast: raku struktuuri uurimine spetsiaalse fluorestseeruva mikroskoobi all, DNA uurimine, kasutades polümeraasi ahelreaktsiooni meetodit, et määrata mutatsiooni olemasolu.

Tulemuse põhjal ei kasutata implantatsiooniprotsessis anomaaliaid omavaid embrüoid. Terve ja kvaliteetne valik. Seejärel kantakse üks või mitu neist ema emakaõõnde.

Polaarse keha biopsiaga uuritakse ema kromosoomi komplekti. Seda tehakse juhul, kui emane joon tõi esile geneetiliselt määratud patoloogia olemasolu. See protseduur võimaldab teil kindlaks teha, kas muna on tervislik, mida kasutatakse väetamiseks ilma selle struktuuri rikkumata. Kui anomaaliaid ei tuvastatud, võib seda kasutada väetamiseks ja emakaõõnde ülekandmiseks.

On juhtumeid, kus polaarseid kehasid skriinitakse ja seejärel blastomereid. See võimaldab teil saada usaldusväärsema tulemuse. Kava, mille kohaselt eksam toimub, valib geneetik.

Kasutatud meetodid

Kromosoomide numbrilised ja struktuursed häired määratakse fluorestsentshübridisatsiooni meetodiga. See meetod võimaldab teil määrata raku DNA järjestuse. Kasutatakse spetsiaalseid DNA sonde, mis nende struktuuris on blastomere DNA tsoonide komplementaarsed piirkonnad.

Sond sisaldab nukleotiidi ja fluorofoori (fluorestseeruv molekul). Pärast sihtmärk-DNA interaktsiooni DNA prooviga moodustuvad valgustatud alad, mida vaadeldakse fluorestsentsmikroskoobi all.

Kasutage ka PCR meetodit (polümeraasi ahelreaktsioon). See hõlmab DNA osa kopeerimist, kasutades teatud laboritingimustes ensüüme.

Aneuploidsuse diagnoosimine

See on üks implantatsioonieelse geneetilise diagnoosi meetodeid, mis võimaldab tuvastada arvulisi kromosoomide kõrvalekaldeid (määrata kindlaks täiendavad või puuduvad kromosoomid).

Geneetiline materjal koosneb 46 kromosoomist, millest poole annab isa ja teine ​​pool ema poolt. Kui embrüo saab ekstra kromosoomi, nimetatakse seda trisoomiaks ja mistahes - monosoomi kaotuseks. Need vead võivad põhjustada järgmisi tagajärgi:

  • embrüo implantatsioon puudub
  • spontaanne abort,
  • pärilikud patoloogiad (Down'i sündroom, Klinefelter, Shereshevsky-Turner).

Meeste viljatus ja abielupaari vanus on selliste kõrvalekallete tekkimisel sageli tegurid.

PGD ​​monogeensed patoloogiad

Embrüote eelpostatsiooni geneetiline diagnoos monogeensete haiguste esinemise kindlakstegemiseks viiakse läbi peredes, kus on loodud pärilikud kõrvalekalded. Kui paaril on juba homogeense haigusega laps, suureneb mitu korda teine ​​haige laps.

Põhjuseks on kromosoomide järjestuse rikkumine DNA teatud osas. Need haigused hõlmavad:

  • tsüstiline fibroos,
  • adrenogeneesiline sündroom
  • fenüülketonuuria,
  • hemofiilia
  • sirprakuline aneemia,
  • Vernig-Hoffmani sündroom.

Meetodi eelised ja riskid

Preimplantatsiooni geneetilisel diagnoosil, mille ülevaatamist peetakse ebaselgeks, on teatud eelised sünnieelse sõeluuringu valdkonnas:

  • Ainult kõrgekvaliteedilised ja terved embrüod kantakse emaka,
  • vähendab geneetiliste kõrvalekalletega lapse ohtu, t
  • kahekordistama abordi riski,
  • kahekordistanud mitmekordse viljakuse riski, t
  • embrüo siirdamise võimalus suureneb 10% võrra;
  • Lapse eduka sündimise võimalus suureneb 20% võrra.

Embrüo juhusliku kahjustumise oht PGD-ga on 1%. Vea tulemuse tõenäosus on 1:10, lisaks sellele hinnatakse 3% võimaliku anomaaliaga embrüo tervisest.

Tõenäosus, et terve embrüo tulemustest kõrvale kaldub, on 1:10. Võimalus 1: 5, et embrüote siirdamine emakasse tühistatakse igas neist leitud kõrvalekallete tõttu.

Vastunäidustused

Implanteerimisele eelneval geneetilisel diagnoosil (PGD), mille tagajärgi embrüole ei ole täpselt kindlaks tehtud, on mitu vastunäidustust:

  • embrüo killustatus üle 30% (peetakse kuni 25% fragmentide moodustumist normaalseks), t
  • paljulubiliste blastomeride olemasolu embrüos, t
  • embrüol on selle arengu kolmandal päeval vähem kui 6 blastomere.

Meetodi ohutus

Diagnoos viiakse läbi tulevase organismi loomise varajases staadiumis, kui kõik selle rakud on polüpotentsed, st igast neist saab moodustada täieõiguslik tervislik organism.

Kõik PGD käimasolevad etapid ei põhjusta embrüole, lootele ja sündimata lapsele aega. Pärast uuringu proovi saamist valmistatakse see spetsiaalselt. Rakud asetatakse klaasplaadile, millele nad on kinnitatud, või puhverlahuses.

Menetluse maksumus

Esmapilgul tundub, et enne implanteerimist pärinev geneetiline diagnostika, mille maksumus varieerub 50 kuni 120 000 rubla, on kulukas manipuleerimine. Kuid geneetiliselt määratud patoloogiat põdevate laste tervis ja ravi maksavad palju rohkem.

Menetlus annab kõik eelised naiste ees, kes võiksid lapse loomulikul viisil ette kujutada, kuna selline diagnostiline meetod ei ole neile kättesaadav. Implanteerimisele eelnev geneetiline diagnostika, mille hind on vähe võrreldes in vitro viljastamisega, on ainult täienduseks üldprogrammile, mis võimaldab mitte ainult neelata ja sünnitada, vaid ka tõsta tervet last.

Kuidas pärivad geneetilised haigused?

Iga vanemate mutatsioon või defektne märk ei põhjusta lapse haiguse ilminguid. Kõik sõltub sellest, kas domineeriv või retsessiivne tunnus on päritud igast abikaasast ja milline on geenide kombinatsioon.

Kui sarnasel kujul domineeriv geen läheb lapsele üle, siis on olemas 50% risk, et pärilik patoloogia ilmneb. Recessiivse haiguse geeniga vanematel on valulik geneetiline tunnus. Et laps saaks patoloogia kliinilisi sümptomeid välja arendada, peab ta pärima kaks retsessiivset geeni.

On ka sooga seotud haigusi. Naistel on kahekümne kolmas kromosoomide paar XX, meestel XY. Kui naise geneetilises materjalis on üks kromosoomidest defektne, siis teise haiguse tõttu blokeeritakse haiguse areng, kuid on olemas patoloogilise geeni kandja. Meestel ei ole Y-kromosoom võimeline blokeerima patoloogilise X-kromosoomi mõju, mistõttu haigus ilmneb sellise paari poegades ja 50% -lised tütred on muudetud geeni kandjad.

Embrüote preimplantaadi geneetiline diagnoos aitab määrata 100% täpsusega, millises kombinatsioonis geneetiline materjal on päritud, laps avaldab haiguse või on patoloogiliste tunnuste kandja.

Kes vajab geneetilist uurimist?

PGD ​​puhul on teatavaid märke. Soovitatav on teha uuring naistele, kes soovivad sünnitada pärast 34 aastat. Selles vanuses, isegi raseduse loomuliku esinemise korral, suurenevad geneetiliste kõrvalekalletega lapse riskid.

Ootsüüdid järk-järgult vananevad, nad puutuvad kogu elu jooksul kokku mitmesuguste negatiivsete teguritega:

  • ema halvad harjumused (suitsetamine, alkoholi joomine),
  • kroonilised haigused
  • ravi ravimitega,
  • kahjulikud töötingimused (keemilised reaktiivid, kõrged temperatuurid, vibratsioon, ioniseeriv kiirgus, elektromagnetväljad), t
  • halb ökoloogia.

Vanuse tõttu kogunevad defektsed munad, mis suurendab patoloogiliste geenide edasikandumise riski. Kui selline embrüo viiakse emakasse, siis enamikul juhtudel see ei juurdu, rasedus katkeb raseduse katkemise tõttu. Või kui rasedus edeneb, näitab järgnev uurimine patoloogiat, mis muutub katkestuse näidustuseks. Preimplantatsiooni diagnoos aitab vältida psühholoogilist traumat, mis on seotud abordi või halvema lapse sünniga. Mees satub vanusegruppi, mis on üle 39 aasta vanune. See hõlmab ka spermatogeneesi patoloogiaga abikaasasid.

Naistel, kellel on harilik abordi, soovitatakse ka PGD. Üks vanematest võib omada kromosoomide defekti, mis mõjutab embrüo arengut ja põhjustab abordi.

Vaadake kindlasti paarid, kellel on autosoomne domineeriv patoloogia. Nende lapsed 50% -l on geeni kandjad või haiguse kliinilised tunnused.

Samuti viib läbi uuringuid:

  • 2 või enam ebaõnnestunud IVF-katset,
  • 3 või enam üritust edastada kõrgekvaliteedilisi embrüoid alla 35-aastastele naistele, kes ei lõppenud raseduse ajal,
  • riskigrupp hilinenud haiguste korral, t
  • soov, et laps oleks HLA-süsteemiga kooskõlas, et saada tüvirakke teise raske haigusega lapse raviks, t
  • konfliktide ennetamiseks Rh-teguriga ühilduva lapse sünd.

Koostatud näidustuste kohaselt aitab PGD vältida järgnevat sünnieelset diagnoosi - amniotsentseesi, mis vähendab abordi riski.

Uuringu eesmärgid

Diagnostika näidustuste alusel saate määratleda selle eesmärgid:

  1. Ebanormaalse kariotüübiga embrüote väljajätmine.
  2. Eelmise IVF-i käigus ebaõnnestunud implantaadi põhjuste tuvastamine.
  3. Vanemate vanemate kõrvalekalletega lapse riski vähendamine.
  4. Tõsiste haiguste suhtes eelsoodumusega embrüote identifitseerimine.
  5. Laps, kes on HLA-ga kooskõlas, sobib venna või õe raviks.
  6. Teatava Rh-teguriga lapse hemolüütilise haiguse riski vähendamine.

Monogeensete haiguste eelimplantaadi geneetiline diagnoos tehakse, et tuvastada:

  • tsüstiline fibroos,
  • Tay-Sachsi haigus,
  • hemofiilia A,
  • Duchenne myodystrophy,
  • sirprakuline aneemia.

Kromosomaalsete kõrvalekallete otsing hõlmab nende üheksa uuringut, mis on tingitud järgmistest sündroomidest:

  • Down (trisoomia 21 kromosoomid),
  • Patau (13. kromosoom),
  • Edwards (18),
  • Shereshevsky-Turner,
  • Klinefelter,
  • "Feline õpilased" (22),
  • kromosoomid 15, 16, 17.

Samuti võimaldab geneetiline otsing paljude teiste haiguste tuvastamist.

Diagnostilised meetodid

PGD ​​puhul kasutatakse embrüoid või mune. Kuid esimesel juhul on uuring sellest ajast saadik informatiivsem embrüol on isa geneetiline materjal, mis võib edastada vigaseid geene.

Uuringus viiakse läbi ühe blastomere biopsia olemasolevas 4-10-s embrüos, mis on purustamisetapis. See toimub 3-5 päeva. Tuleviku lootele ei kahjusta.

Seda tehnikat saab kasutada ainult IVF-i protseduuril, kombineerituna ICSI-ga - kunstliku seemendamisega sperma abil. Seda tehakse nii, et blastomere biopsia protsessis ei võeta uuringusse viljastamisel osalenud spermatosoidi geneetilist materjali.

Edasine embrüo siirdamine ja raseduse juhtimine toimub nagu tavalises IVF-is. Analüüsiks on eraldatud vaid 2 päeva, taasistutamine peaks toimuma hiljemalt 5 päeva jooksul. Rohkem võimalusi tsüklil diagnoosimiseks krüo-säilitamisega. Kui teete mõnede embrüote biopsiat ja seejärel neid säilitate, siis saate ohutult teostada maksimaalset võimalikku uurimistööd ja järgmise tsükli jaoks taastada kõrge kvaliteediga embrüo.

Töötanud välja mitu tehnikat PGD jaoks.

Kasutatakse kromosoomide arvuliste või struktuuriliste muutuste diagnoosimiseks - aneuploidia ja translokatsioonid. Biopsia abil saadud rakk fikseeritakse slaidile, kuumutatakse ja jahutatakse. Kui see juhtub, siis selle korpuse purunemine ja tsütoplasma vabanemine. DNA segmendid on märgistatud fluorestsentssondidega - spetsiaalsed värvained. Lisaks saab spetsiaalses fluorestsentsmikroskoobis lugeda spetsiifilisi kromosoome, tuvastada normaalset ja patoloogilist.

Polümeraasi ahelreaktsioon põhineb konkreetsete DNA koopiate identifitseerimisel. Esiteks on see denatureeritud, et kahekordne lõng lahti lasta ja saada üks fragment. Eriliste ensüümide lisamisega kahekordistatakse geneetilise materjali kogust. See võimaldab tuvastada nukleotiidis vigaseid saite. Seda meetodit kasutatakse monogeensete haiguste otsimiseks, kui üks või kaks abikaasat on defektsete geenide kandjad või haiguse kliinilised tunnused.

  • Uusim NGS tehnika

Innovatsiooniks on NGS meetodi abil krüotsükli eelimplantaadi geneetiline diagnoos, mille abil on võimalik uurida kõiki 23 kromosoomi paari. Selle täpsus on 99,9%. Samal ajal on käimas monogeensete ja kromosoomide patoloogiate ning mutatsioonide uuring. See meetod võimaldab eristada tasakaalustatud translokatsiooni tavalisest kromosoomide kogumist. Seetõttu ei ole vaja blastomeeride biopsiat korrata. Kõrge protsessi automatiseerimine kõrvaldab täiendavad vead.

Kasu ja riskid

Embrüo geneetilise analüüsi kasutamine lõhustamisetapis suurendab eduka implantatsiooni võimalusi. On tõestatud, et kromosomaalsed muutused embrüos suurendavad raseduse katkemise tõenäosust varases perioodis, mitteareneva raseduse tekkimist. В 21% случаев самопроизвольного прерывания беременности, в том числе полученной методом ЭКО, причиной прерывания становится хромосомная патология плода. С возрастом количество аномалий увеличивается в геометрической прогрессии.Kui arvame, et vanemaealiste naiste puhul kasutatakse kõige sagedamini abistavaid reproduktiivtehnoloogiaid, selgub, et diagnostika peaks toimuma enne embrüo taasistutamist.

Saadud teavet võib arst kasutada IVF-i edasiste katsete ajal, samuti soovitada põhjuseid, miks varasemad ebaõnnestunud katsed viljastada.

PCR või fluorestsentsmeetodi kasutamisel saab uurida ainult teatud arvu kromosoome. Seetõttu võivad mõned vead pärida.

See juhtub, et implantatsioonieelse geneetilise diagnoosi ajal määratletakse normaalne ebanormaalne embrüo. Sellisel juhul aitab järgnev sünnieelne diagnoos patoloogia täpselt diagnoosida. Teaduse arengu selles etapis ei suuda PGD viimast täielikult asendada. Mõnikord on geneetilised anomaaliad moodustatud mosaiigi poolt. Sel juhul kinnitab ühe blastomere biopsia embrüo normaalset seisundit ja haigus tuleneb muutunud raku süüst.

Embrüo kahjustused biopsia ajal on äärmiselt haruldased, 0,1% juhtudest. Samuti tuleb meeles pidada, et isegi pärast edukat diagnoosi ja normaalse embrüo taasistutamist võib IVF teadmata põhjustel ebaõnnestuda. Sel juhul võib põhjuseks olla ema keha immuunhäired, diagnoosimata haigused. Ainult IVF-i ettevalmistamise täielik tervislik eluviis suurendab rasestumise võimalusi.

Sisu

Eelimplantatsiooni geneetilise diagnoosi idee ilmus enne esimese IVF lapse sündi. 1967. aastal avaldas R. Edwardsi artikkel (R. G. Edwards) ja R. Gardner (R. L. Gardner) küüliku embrüote biopsia sooritamiseks soo määramiseks enne implanteerimist, kus autorid ennustasid sarnaste tehnoloogiate ilmnemist inimestel [2]. Inimeste preimplantatsiooni geneetiline diagnostika sai aga võimalikuks alles 90-ndate aastate alguses, kui saavutati piisav tehnoloogiline in vitro viljastamise tase ja töötati välja polümeraasi ahelreaktsioon, mis võimaldab DNA analüüsi üksikutes rakkudes.

1989. aastal teostati esimene edukas katse soo kindlaksmääramiseks, kasutades embrüost lõhustamisetapis (6-8 blastomereid) võetud blastomere PCR-analüüsi [3]. Esimesed edukad tarned pärast sarnast menetlust paaridel, kellel oli risk retsessiivse X-seotud haiguse tekkeks, toimusid 1990. aastal [4].

1990. aastal diagnoositi enne viljastamist monogeenset haigust ja tehnika hõlmab polaarsete munarakkude PCR-analüüsi [5].

Lapse esimene sünnitus pärast monogeensete haiguste (tsüstiline fibroos) PCR-eelset diagnoosimist toimus 1992. aastal [6].

Seejärel kasutati embrüo sugu ja kromosomaalsete kõrvalekallete määramiseks in situ (FISH) fluorestseeruvat hübridisatsiooni. Alates 2012. aastast asendatakse FISH-meetod kromosomaalsete kõrvalekallete määramiseks järk-järgult võrdleva genoomse hübridisatsiooniga. PCR meetod on monogeensete haiguste diagnoosimiseks hädavajalik.

Preimplantatsiooni geneetiline diagnoos on näidustatud paaridele, kellel on kromosoomide ümberkorraldamise või monogeense haiguse kandja. Monogeensete haiguste näideteks on tsüstiline fibroos, Tay-Sachsi haigus, sirprakuline aneemia, hemofiilia A, Duchenne'i lihasdüstroofia ja paljud teised.

Lisaks teostatakse preimplantatsiooni geneetiline diagnoos lastel kaasasündinud anomaaliate suurenenud riskiga paaridel, mis ei ole seotud diagnoositud mutatsioonide vedamisega. Selliste juhtumite hulka kuuluvad paarid, kus ema vanus on üle 35 aasta vana, kui isa vanus on üle 39 aasta vana, kui isal on tõsine spermatogenees, tavapärase abordiga paarid, korduva ebaõnnestunud IVF katsed.

Määratlemata suurenenud risk kaasasündinud anomaaliaga lapse olemasolu korral teostatakse preimplantatsiooni geneetiline diagnoos üheksa kromosoomi puhul, mis on seotud kõige tavalisemate kaasasündinud haigustega. Need on kromosoom 13 (Patau sündroom), kromosoom 15 (Prader-Willi sündroom), kromosoom 16, kromosoom 17, kromosoom 18 (Edwards'i sündroom), kromosoom 21 (Down'i sündroom), kromosoom 22 ("kassiõpilaste sündroom") ja ka sugu kromosoomid X ja Y (erinevad arvulised anomaaliad, sealhulgas Shereshevsky-Turneri sündroom ja Kleinfelteri sündroom).

Preimplantatsiooni geneetiline diagnoos viiakse läbi mõnel juhul, mis ei ole seotud loote võimaliku geneetilise patoloogiaga, sellise diagnoosi eesmärk on teatud geneetiliste omadustega lapse sünd. Selliste juhtumite hulka kuuluvad näiteks preimplantatsioonigeneetiline diagnostika, mida teostatakse reesusevastaste konfliktide ärahoidmiseks.

On juhtumeid, kus kombineeritakse mitmeid eeltöötlemise eeltingimusi. Üks selline näide on juhul, kui preimplantatsiooni geneetilise diagnoosi abil sündis probandis HLA-ga ühilduv doonor Fankoni aneemia rakuteraapias [7]. Sel juhul välistati Fanconi aneemia ja valiti soovitud histokompatibilisuse tüüp.

Preimplantatsiooni diagnoosimine on võimalik ainult IVF-i ravitsükli raames või pigem in vitro viljastamisel spermatosoidide (ICSI) intraplasmaatilise süstimisega, st spermatosoidi süstitakse muna "käsitsi" mikrokirurgiliste instrumentide abil. ICSI protseduur on vajalik, kuna normaalses IVF-s lisatakse munarakku suur hulk seemnerakke. Seejärel tekib polaarsete kehade või blastomeeride kogumisel oht, et spermatosoidi, mis ei osalenud viljastamises, geneetiline materjal läheb analüüsiks embrüo rakuga.

Ravitsükli ettevalmistamine ja IVF-ravitsükkel ise PGD-ga ei erine oluliselt tavalisest IVF-ravitsüklist:

  1. naine saab superovulatsiooni stimuleerimiseks hormonaalseid ravimeid,
  2. tehakse transvaginaalset folliikuleid,
  3. munade viljastamine seemnerakkudega toimub embrüoloogia laboris, t
  4. embrüo siirdamine emakasse kestab 5-6 päeva.

Kui geneetiline haigus pärineb naiselt, siis saab “terveid” embrüoid valida, kui testimenetlus viiakse läbi ainult polaarsetele kehadele, puudutamata embrüot ise. Võite ka testida ainult blastomereid. Või võib läbi viia polaarsete kehade, seejärel blastomeeride järjestikuse uuringu.

Millist PGD skeemi rakendatakse iga konkreetse juhtumi puhul, määratakse PGD kavandamisel konsulteerides geneetilise arsti või spetsiaalselt koolitatud PGD konsultandiga.

Meioosi esimeses jagamises jagatakse 1. järjekordne ootsüüt, mille tulemusena moodustub 2. järjekordne ootsüüt ja väike esimene redutseeriv keha (mõlemad rakud haploidse kromosoomide kogumiga). Meioosi teises jagamises moodustub 2. järjekorra ootsüüdi jagunemise tulemusena üks munarakk ja teine ​​redutseeriv keha. Esimene redutseeriv keha jagab mõnikord ka kahte identset väikest rakku. Nende esimese astme transformatsioonide tulemusena moodustatakse üks munarakk ja kolm redutseerimiskeha, kus nii munarakul kui ka redutseerivatel organitel on haploidne kromosoomide kogum. Seega on võimalik uurida polaarseid kehasid, et teha kindlaks, kas muna on pärinud geneetilise defekti.

Pärast munarakkude viljastamist embrüoloogia laboris sperma poolt areneb embrüo - rakud jagunevad. Kolmandal päeval koosneb embrüo 6-8 blastomeerist. Kolmandal päeval kogutakse geneetiliseks uurimiseks bioloogilist materjali - nn "embrüo-biopsiat", st ühe blastomere ekstraheerimist embrüost (ja mõnikord ka polaarsetest kehadest) spetsiaalsete mikrotoolide abil. Menetlus ei riku embrüo edasist arengut. Geneetilise diagnostika läbiviimise ajal arenevad embrüod jätkuvalt sobivas söötmes kuni siirdumiseni emakasse 5. arengupäeval. Selleks ajaks peab embrüo jõudma blastotsüsti etappi.

Enne siirdamist hindab embrüoloog embrüote struktuuri ja kuju. Geneetilise diagnoosi tulemust võrreldakse embrüote morfoloogiaga ja tehakse järeldus selle kohta, milliseid embrüoid soovitatakse emakasse üleviimiseks. Ülekandmiseks valitakse parimate morfoloogiliste omadustega embrüod ilma geneetiliste häireteta.

Analüüs viiakse läbi väga lühikese aja jooksul. Blastomeeride analüüsiks on saadaval vaid 2 päeva, sest embrüo ei saa edasi areneda väljaspool ema keha peale blastotsüsti etapi (5. päev pärast viljastamist), mistõttu tuleb uuring läbi viia lühikese aja jooksul.

Alternatiivne lähenemine on teostada PGD krüotsüklis. Sellisel juhul viiakse biopsia läbi 5. arengupäeval ja kohe pärast seda läbivad embrüod krüo-säilitamise. Järgmisel kuul teostatakse geneetiline diagnoos ja soovitatavad embrüod ilma mutatsioonita kantakse emakasse järgmise tsükli jooksul. Ühendatud tsükli praktiseerimisel on mitmeid eeliseid: väiksem risk ülestimuleerimiseks, rohkem materjali ja analüüsi aeg, vähem embrüo-biopsia traumaatiline protseduur. Krüotsükli puuduseks on pikem aeg alates stimuleerimise algusest embrüo siirdamisele [1].

  1. Numbriliste ja struktuuriliste kromosomaalsete kõrvalekallete puhul kasutatakse FISH-i (fluorestseeruv hübridisatsioon) in situ). Tavaliselt viiakse läbi kolme, viie või seitsme kromosoomi, enamasti kromosoomide 13, 18, 21, X ja Y numbriliste rikkumiste analüüs.
  2. FISHi meetodi kaasaegne alternatiiv on võrdlev genoomne hübridisatsioon mikrokiipidel (GHS). GHS võimaldab teil testida kõiki kromosoome korraga.
  3. Monogeensete haiguste PGD läbiviimisel kasutatakse PCR meetodit.

Fluorestseeruv hübridisatsioonimeetod in situ (FISH) on tsütogeneetilise analüüsi meetod, mida kasutatakse spetsiifiliste DNA järjestuste identifitseerimiseks ja lokaliseerimiseks metafaasi kromosoomidel ja interfaasi tuumades. See meetod kasutab DNA sonde, mis on piiratud suurusega nukleotiidjärjestus, mis on komplementaarne tuuma DNA spetsiifilise piirkonnaga. Sond kannab "märgist", see tähendab, et see sisaldab fluorofooriga seotud nukleotiide (fluorestseeruv molekul). Pärast hübridisatsiooniprotseduuri sondi ja sihtmärk-DNA hübriidse DNA molekuli moodustumise korral uuritava tsütogeneetilise preparaadi korral saab fluorestsentsmikroskoobi abil tuvastada spetsiifiliste DNA järjestuste luminestsentsi kromosoomidel või tuumadel.

Polümeraasi ahelreaktsioon on meetod, mis põhineb DNA teatud osa korduval kopeerimisel, kasutades ensüüme kunstlikes tingimustes (in vitro). Sellisel juhul kopeeritakse ainult määratletud tingimustele vastav ala ja ainult siis, kui see on uuritavas proovis.

Pin
Send
Share
Send
Send